|
 Nguyễn Minh Nam
ĐỀ CƯƠNG MÔN HỌC
ELISA NÂNG CAO (ADVANCED ELISA)
1. Thông tin về giảng viên:
Họ và tên: Nguyễn Minh Nam
Lê Văn Huy
Chức danh, học hàm, học vị: Kỹ sư
Thời gian, địa điểm làm việc: Viện Nghiên cứu CNSH& MT- ĐH Nông lâm TPHCM
Địa chỉ liên hệ: Nhà Cẩm Tú- ĐH Nông lâm TPHCM
Các hướng nghiên cứu chính: - CNSH động vật.
- DNA vaccine.
- CNSH thực vật.
2. Thông tin chung về môn học
- Tên môn học: ELISA nâng cao – advanced ELISA.
- Mã môn học: 211405
- Số tín chỉ: 1
- Môn học: Lựa chọn.
- Các môn học tiên quyết: Sinh học phân tử, miễn dịch học.
- Các môn học kế tiếp: Công nghệ Sinh học Thủy sản, Công nghệ Sinh học động vật, Công nghệ Sinh học Thực phẩm, Công nghệ Sinh học Thực vật, Kỹ thuật chẩn đoán, Công nghệ Sinh học Môi trường.
- Các yêu cầu đối với môn học:
- Giờ tín chỉ đối với các hoạt động:
+ Nghe giảng lý thuyết: 5 tiết
+ Làm bài tập trên lớp: 0 tiết
+ Thảo luận: 1 tiết
+ Thực hành, thực tập (ở PTN, nhà máy, studio, điền dã, thực tập...): 24 tiết
+ Hoạt động theo nhóm: 0 tiết
+ Tự học: 0 tiết
3. Mục tiêu của môn học
- Kiến thức:
ü Trang bị kiến thức cơ bản và chuyên sâu của kỹ thuật ELISA.
ü Củng cố kiến thức về miễn dịch học.
ü Hiểu được các ứng dụng của kỹ thuật ELISA trong các lĩnh vực công nghệ sinh học khác.
- Kỹ năng: Làm việc theo nhóm, bố trí thí nghiệm, đánh giá kết quả thí nghiệm, thao tác trong thí nghiệm sinh học phân tử.
- Thái độ, chuyên cần: rèn luyện cho sinh viên tính chuyên cần và thái độ khoa học trong học tập, nghiên cứu và làm việc.
4. Tóm tắt nội dung môn học
Môn học góp phần củng cố kiến thức về miễn dịch học, các kỹ thuật miễn dịch cơ bản và cung cấp cho sinh viên kiến thức và kỹ năng về kỹ thuật ELISA. Bao gồm việc lựa chọn kit ELISA, tiến trình thí nghiệm, phân tích kết quả ELISA, sản xuất và quản lý chất lượng kit ELISA, ứng dụng của kỹ thuật ELISA trong các lĩnh vực khác như: phát hiện virus, xác định dư lượng kháng sinh, định lượng PCR,…
5. Nội dung chi tiết môn học
Bài 1: Kỹ Thuật Miễn Dịch Học Cơ Bản Trong Chuẩn Đoán Sinh Học
- Lý thuyết
1.1. Miễn dịch học căn bản
1.1.1. Đáp ứng miễn dịch
1.1.2. Các thành phần miễn dịch
1.1.2.1.Huyết thanh
1.1.2.2.Bổ thể
1.1.2.3.Các globulin miễn dịch
1.1.2.4.Kháng thể
1.1.3. Sản xuất kháng thể đơn dòng
1.1.4. Một số kỹ thuật chuẩn đoán miễn dịch căn bản
1.1.4.1.Thử nghiệm miễn dịch phóng xạ (radio immunoassays)
1.1.4.2.Thử nghiệm miễn dịch huỳnh quang (immunofluorescence assays)
1.1.4.3.Thử nghiệm miễn dịch enzyme (immunoenzyme assays)
1.1.4.4.Các thiết bị chuẩn đoán miễn dịch nhanh.
1.1.4.5.Kết tủa miễn dịch
1.1.4.6.Ngưng kết miễn dịch
1.1.4.7.Định giá kháng thể
1.2. Kĩ thuật ELISA
1.2.1. Nguyên tắc, ưu và nhược điểm
1.2.2. Các thành phần phản ứng
1.2.3. Các kỹ thuật ELISA
1.2.3.1.Direct ELISA
1.2.3.2.Indirect ELISA
1.2.3.3.Sandwich ELISA
1.2.3.4.ELISA cạnh tranh
1.2.4. Các ứng dụng
1.2.4.1.Kiểm tra tác nhân gây bệnh
1.2.4.2.Định lượng phản ứng PCR
1.2.4.3.Xác định dư lượng kháng sinh trong thực phẩm
1.2.4.4.Kiểm tra sản phẩm biến đổi gen
1.2.4.5.Kiểm tra độc tố trong thực phẩm
1.2.5. Các bước trong kĩ thuật ELISA
1.2.5.1.Gắn kháng thể (hoặc kháng nguyên) lên đĩa
1.2.5.2.Rửa
1.2.5.3.Thêm kháng nguyên (hoặc kháng thể) cần phát hiện vào giếng
1.2.5.4.Ủ phản ứng và Rửa
1.2.5.5.Thêm Enzyme tạo màu và cơ chất phát hiện
1.2.5.6.Đọc - phân tích kết quả
1.2.6. Mẫu phân tích
1.2.6.1.Phương pháp lấy mẫu
1.2.6.2.Bảo quản mẫu
1.2.6.3.Chuẩn bị mẫu
1.2.7. Lựa chọn thiết bị và kit ELISA
1.2.8. Kỹ thuật sản xuất kit ELISA
- Thực hành: pha hóa chất và chuẩnbị thiết.
Bài 2: Phân tích dư lượng kháng sinh trong mẫu thực phẩm bằng kỹ thuật ELISA
1. Nguyên lý chung
1.1. Kháiquát chung
1.2. Nguyên lý của phương pháp
1.3. Các hoá chất cung cấp trong kit
1.4. Các hóa chất và dụng cụ cần thiết nhưng không được cung cấp trong kit
1.5. Chú ý đối với người sử dụng
1.6. Bảo quản kit
1.7. Chỉ thị hoá chất mất hoạt tính
1.8. Chuẩn bị mẫu
1.9. Phân tích
1.10. Kết quả
1.11. Độ nhạy
1.12. Tính đặc hiệu
1.13. Độ chính xác
1.14. Hiệu suất thu hồi
2. Thực hành: kiểm tra dư lượng kháng sinh bằng kỹ thuật EKISA cạnh tranh.
Bài 3: Phát hiện virus gây bệnh thực vật bằng kỹ thuật ELISA.
1. Lý thuyết
1.1. Khái quát chung
1.2. Nguyên lý của phương pháp
1.3. Các hoá chất cung cấp trong kit
1.4. Các hóa chất và dụng cụ cần thiết nhưng không được cung cấp trong kit
1.5. Chú ý đối với người sử dụng
1.6. Bảo quản kit
1.7. Chỉ thị hoá chất mất hoạt tính
1.8. Chuẩn bị mẫu
1.9. Phân tích
1.10. Kết quả
1.11. Độ nhạy
1.12. Tính đặc hiệu
1.13. Hiệu suất thu hồi
1.14. Độ chính xác
2. Thực hành: kiểm tra virus thực vật bằng kỹ thuật sandwich ELISA
6. Học liệu
- Học liệu bắt buộc ghi theo thứ tự ưu tiên (tên tác giả, tên sách, nhà xuất bản, năm xuất bản, nơi có tài liệu này, website, băng hình,...).
ü Crowther John R., 2001. Methods in Molecular Biology, Vol 149. The ELISA Guidebook. Humana Press. Totowa, New Jersey 421p.
ü Crowther JR (1995) Methods in Molecular Biology, Vol 42 ? ELISA: Theory and Practice. Humana Press,
- Học liệu tham khảo ghi theo thứ tự ưu tiên (tên tác giả, tên sách, nhà xuất bản, năm xuất bản, nơi có tài liệu này, website, băng hình…)
ü Tominaga K, Miura Y, Arakawa T, Kobayashi K, Mitsuhashi M (1996) Colorimetric ELISA measurement of specific mRNA on immobilized-oligonucleotide-coated microtiter plates by reverse transcription with biotinylated mononucleotides. Clin Chem 42(11): 1750-7.
ü Zreiqat H, Sungaran R, Howlett CR, Markovic B (1998) Quantitative aspects of an in situ hybridization procedure for detecting mRNAs in cells using 96-well microplates. Mol Biotechnol 10(2): 107-13.
7. Hình thức tổ chức dạy học
Lịch trình chung
|
Nội dung
|
Hình thức tổ chức dạy học môn học
|
Tổng
|
|
Lên lớp
|
Thực hành, thí nghiệm, thực tập giáotrình, rèn nghề, …
|
Tự học, tự nghiên cứu
|
|
Lý thuyết
|
Bài tập
|
Thảo luận
|
|
Bài 1
|
3
|
0
|
|
7
|
0
|
10
|
|
Bài 2
|
1
|
0
|
1
|
8
|
0
|
10
|
|
Bài 3
|
1
|
0
|
1
|
8
|
0
|
10
|
8. Chính sách đối với môn học và các yêu cầu khác của giảng viên
Yêu cầu sinh viên tham dự đầy đủ và hoàn thành tất cả các bài thực hành trong từng buổi học.
9. Phương pháp, hình thức kiểm tra - đánh giá kết quả học tập môn học
- Tham gia trên lớp: 20 %.
- Hoàn thành bài thu hoạch sau mỗi bài thí nghiêm: 30%
- Kiểm tra cuối kỳ: 50%.
9.1. Kiểm tra – đánh giá thường xuyên
9.2. Kiểm tra - đánh giá định kì: Bao gồm các phần sau (trọng số của từng phần do giảng viên đề xuất, chủ nhiệm bộ môn thông qua):
- Tham gia học tập trên lớp (đi học đầy đủ, chuẩn bị bài tốt và tích cực thảo luận, …): 20%
- Phần tự học, tự nghiên cứu (hoàn thành tốt nội dung, nhiệm vụ mà giảng viên giao cho cá nhân /tuần; bài tập nhóm /tháng; bài tập cá nhân/ học kì, …);
- Hoạt động theo nhóm
- Kiểm tra - đánh giá giữa kì
- Kiểm tra - đánh giá cuối kì: 50%
- Các kiểm tra khác Số lần xem trang : 14906
Nhập ngày : 21-01-2009
Điều chỉnh lần cuối : 23-07-2010 Ý kiến của bạn về bài viết này
Bài giảng  Nội dung thực tập chuyển gen vào tế bào thực vật(03-02-2009)
Phương pháp xác định ẩm độ(21-01-2009) Phương Pháp Xác Định Nito(21-01-2009)
|
Đang xem 16
In trang này
Lên đầu trang
Gởi ý kiến